DNA凝胶回收试剂盒/DNA Gel Extraction Kit

产品简介

产品简介：
    碧云天2005年底最新推出的DNA凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit)，是目前世界上最先进的DNA凝胶回收试剂盒之一。本产品采用了融胶液，可以使琼脂糖凝胶完全融化。同时采用了一种新型的离子交换柱，在特定条件下，使DNA能在离心过柱的瞬间，结合到DNA纯化柱上，在一定条件下又能将DNA充分洗脱，从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，通常12个样品只需不足20分钟即可完成。
    DNA纯化柱的容量约为15微克。
    适用于PCR反应后去除引物，酶，矿物油，甘油，盐等杂质；也同样适用于酶切，连接，磷酸化，补平或切平，随机引物等反应后的DNA纯化。所得DNA可直接用于酶切，连接，转化细菌，测序，PCR，杂交等后续操作。本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。长至30个碱基的引物均可被完全去除。
    DNA回收效率通常为60-90%。接近100bp或10kb的DNA片断回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
    每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
D0056-1	溶液I(融胶液)	20ml
D0056-2	溶液II(洗涤液)	26ml(第一次使用前加入39ml无水乙醇)
D0056-3	溶液III(洗脱液)	3ml
—	DNA纯化柱	50个
—	废液收集管	50个
—	说明书	1份

保存条件：
    室温保存，一年有效。
注意事项：
    第一次使用前在溶液II(洗涤液)中加入39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
    溶液I对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
    本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
    废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明：
1. 切胶回收后，称重，将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
2. 加入等体积的溶液I（如胶为100mg，则加100微升溶液I），vortex或颠倒混匀。
3. 50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融，期间，需vortex或颠倒混匀3-4次，以加速凝胶融解。
   如果胶碎片较小，3-5分钟即可全融，凝胶碎片较大则需较长时间，胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2
   分钟。50-60℃间任一温度都适合于本试剂盒。如果DNA片断大于5kb，宜颠倒混匀。Vortex容易导致大片
   断DNA断裂。
4. 加入到DNA纯化柱内，室温放置1分钟。
   如果体积较大，DNA纯化柱内容纳不下，可以把部分样品加入到纯化柱内，经离心处理后，再加入剩余的
   样品继续处理。
5. 最高速(16000g，约12000-14000rmp左右)离心1分钟，倒弃收集管内的液体。
   注意：这一步一定要达到16000g，较低离心速度会导致回收效率下降。
6. 在DNA纯化柱内加入700微升溶液II，室温放置1分钟。
7. 最高速离心1分钟，洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
8. 再加入500微升溶液II，最高速离心1分钟，进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
9. 最高速再离心1分钟，除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
10. 将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上，加入30微升溶液III至管内柱面上，放置1分钟。
   用1.5ml离心管作为收集管。溶液III需要直接加至管内柱面中央，使液体被纯化柱吸收。如果不慎将溶
   液III沾在管壁上，一定要震动管子，使液体滑落到管底，以便被纯化柱吸收。也可以用重蒸水或MiliQ
   级纯水替代溶液III，但是水的pH应不小于6.5。如需得到较高浓度的DNA，可以只加20微升溶液III，但
   产量会略有下降。放置较长时间例如3-5分钟，会对提供产量略有帮助。
11. 最高速离心1分钟，所得液体即为高纯度DNA。

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