Caspase 3 活性检测试剂盒

 产品编号: C1115
 产品包装: 20次
 产品价格: 496.00元
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产品简介

产品简介:

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C1115 Caspase 3 活性检测试剂盒 20次 496.00元

    Caspase 3活性检测试剂盒(Caspase 3 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液
caspase 3酶活性或纯化的caspase 3酶活性的试剂盒。
    Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。
Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain,有时被写作caspase-3或caspase 3,属于caspase家族的CED-3亚
家族(CED-3 subfamily)
,是细胞凋亡过程中的一个关键酶。Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一
caspaseCaspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,并可以直接特异性剪切许多caspase底物,包括
PARP(poly(ADP-ribose)polymerase),ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease),gelsolin和
fodrin等。这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞
核凋亡过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragme
ntation)
等。同时caspase 3对细胞起泡(cell blebbing)也起到关键作用。
    本Caspase 3活性检测试剂盒是基于caspase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-
Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 3的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
    试剂盒中提供了caspase 3催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 3酶活性的标准品。
    本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20
样品。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

C1115-1

裂解液

8ml

C1115-2

检测缓冲液

8ml

C1115-3

Ac-DEVD-pNA(2mM)

200μl

C1115-4

pNA(10mM)

200μl

说明书

1份

保存条件:
    -20℃保存,Ac-DEVD-pNA和pNA需避光保存。
注意事项:
    须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优
先考虑测定A405,如有困难可以测定A400
    Ac-YVAD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。
    测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006),可向碧云天订购。建议样品用水稀释1倍后
再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
    有文献报道少数类型的细胞凋亡检测不到caspase 3的激活。
    pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝
固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
    本试剂盒的裂解液可以和碧云天生产的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用,即本试剂盒裂
解液制备的蛋白样品可以用于碧云天其它caspase活性检测试剂盒的检测。
    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放
于普通住宅内。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1.准备工作:
  a.裂解液溶解后混匀并置于冰浴上备用。
  b.检测缓冲液溶解后混匀并置于冰浴上备用。
2.测定pNA标准曲线:
  a.标准品稀释液的配制:按照每0.9ml检测缓冲液加入0.1ml裂解液的比例配制适量的标准品稀释
    液。
  b.把试剂盒提供的pNA (10mM)用标准品稀释液稀释为0、10、20、50、100和200μM,作为标准
    品。
  c.每个浓度取100μl用酶标仪进行检测,或取适当量用容量不超过100μl的分光光度检测杯进行检
    测,测定A405
  d.每一个标准品的A405减去不含pNA的空白对照的A405计算出实际的因pNA而导致的吸光度,并制
    作出pNA浓度相对于A405的标准曲线。pNA标准曲线可以参考图1,在0-200μM范围内存在良好的
    线性关系。
                   
    图1.pNA标准曲线。实测数据可能因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参
    考。
3.样品的收集:
  a.