β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒

 产品编号RG0039
 产品包装: >100次
 产品价格: 438.00元
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产品简介

产品简介:
    β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒(In Situ β-galactosidase Staining Kit)是一种用于细胞或组织β-半乳糖苷酶原位染色检测的试剂盒。β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。本试剂盒可以用于组织切片的染色,也可以用于培养细胞的染色。
    碧云天生产的β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒,以X-Gal为底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
    如果使用6孔板检测,足够测定100个样品;使用24孔板测定,足够测定400个样品;使用96孔板测定,足够测定1000个样品。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通的切片也至少足够检测100个样品。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

RG0039-1

β-半乳糖苷酶染色固定液

100ml

RG0039-2

X-Gal溶液

5ml

RG0039-3

β-半乳糖苷酶染色液A

1ml

RG0039-4

β-半乳糖苷酶染色液B

1ml

RG0039-5

β-半乳糖苷酶染色液C

100ml

说明书

1份

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。
注意事项:
    β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。
    β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀,属正常现象,充分混匀或Vortex后,沉淀会全部溶解。作为常规,试剂使用前必须确保沉淀全部溶解,并且混匀。
    配制染色工作液时需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色时可以在聚苯乙烯(polystyrene)容器中进行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
    需自备PBS。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 转染细胞:采取适当的方法将表达β-半乳糖苷酶的质粒转染细胞。转染细胞24-48小时后可以使用本试剂
   盒进行原位染色,检测β-半乳糖苷酶的表达。
2. 对于6孔板,吸除细胞培养液,加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定10分钟。对于其它类型的
   培养板,固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
3. 吸除细胞固定液,用PBS洗涤细胞3次,每次3分钟。
4. 吸除PBS,每孔加入1毫升染色工作液。使用聚丙烯(polypropylene)容器,不能使用聚苯乙烯
   (polystyrene)容器配制染色工作液。染色工作液的配制如下:

β-半乳糖苷酶染色液A

10μl

β-半乳糖苷酶染色液B

10μl

β-半乳糖苷酶染色液C

930μl

X-Gal溶液

50μl

5. 37℃孵育20分钟至2小时,或更长时间,直至部分细胞的颜色变蓝。如果孵育时间较长,可以用parafilm
   或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。
6. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数,可以去除染色工作液,加入2毫升PBS,4℃可以保存数
   天。如果用于计算转染效率,转染效率=染色阳性细胞数/总细胞数X100%。
对于组织切片或非常小的组织块:
1. 对于组织切片或非常小的组织块,加入适当体积的β-半乳糖苷酶染色固定液,以充分盖住组织为宜,室
   温固定不少于10分钟。对于小的组织块,固定时间应该适当延长。
2. 用PBS洗涤组织3次,每次不少于5分钟。对于组织块,时间还要适当延长。
3. 吸除PBS,每孔加入1毫升染色工作液。染色工作液的配制参照上面对于培养细胞样品的第4步。
4. 吸除细胞固定液,用PBS洗涤组织3次,每次不少于5分钟。对于组织块,时间还要相应延长。
5. 37℃孵育20分钟至2小时,或更长时间,直至部分细胞的颜色变蓝。如果孵育时间较长,可以用parafilm
   或保鲜膜封住放置组织的容器,以防止蒸发。
6. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察,可以去除染色工作液,加入2毫升PBS,4℃可以保存数天。


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